Guanidinthiocyanat 593-84-0 letter udvindingen af ​​nukleotider og peptider fra dyrs indvolde

Guanidinthiocyanat | 593-84-0 | er et stærkt proteindenatureringsmiddel. Det er et hvidt krystallinsk pulver, irriterende og følsomt over for lys. Det er opløseligt i ethanol og vand med et smeltepunkt på 118℃. Guanidintiocyanat bruges hovedsageligt til denaturering, lysis af celler og ekstraktion af RNA og DNA. Det er en almindelig kemisk komponent til nukleinsyreekstraktion.

Patent cn111500664a beskriver en fremgangsmåde til ekstraktion af nukleotider og polypeptider fra dyreindvolde under anvendelse af guanidinthiocyanat. Nukleotider er forbindelser sammensat af purinbase eller pyrimidinbase, ribose eller deoxyribose og phosphorsyre, som er meget udbredt i medicin, mor- og barnprodukter, krydderier og fødevaretilsætningsstoffer. Polypeptid er α- Forbindelser dannet af aminosyrer forbundet med peptidbindinger er mellemprodukter af proteinhydrolyse, der involverer forskellige områder af menneskelige hormoner, nerver, cellevækst og reproduktion. Deres betydning ligger i at regulere de fysiologiske funktioner af forskellige systemer og celler i kroppen, aktivere relevante enzymer i kroppen, fremme permeabiliteten af ​​den mellemliggende metaboliske membran eller kontrollere DNA-transkription eller påvirke specifik proteinsyntese, til sidst producere specifikke fysiologiske effekter.

Animalsk indvold er rig på nukleotider og peptider, men på nuværende tidspunkt udføres ekstraktionen af ​​nukleotider og peptider for det meste separat, hvilket resulterer i spild af ressourcer og komplekse processer. Guanidinthiocyanat er nyttigt til at ekstrahere nukleotider og peptider fra dyreindvold. De specifikke metoder er som følger:

Vask først indvoldene fra friske dyr, dræn dem, hak dem, mos dem, tilsæt deioniseret vand for at opnå den blandede opløsning, tilsæt derefter guanidinthiocyanatopløsning til den blandede opløsning, vibrér og bland godt, og lad det stå. Derefter tilsættes en bærer indeholdende silica, fordi guanidinthiocyanat vil spalte cellerne, og nukleotiderne frigivet fra cellerne vil blive kombineret med silicabæreren. Tag bæreren indeholdende silica ud, absorber og adskil den med eluent for at opnå oprensede nukleotider.

Derefter tilsættes NaCl-opløsning til den resterende opløsning, hvorfra silicabæreren er taget ud, den blandede opløsning ekstraheres, derefter tilsættes sammensat protease, derefter udføres mikrobølgeenzymatisk hydrolyse, den enzymatiske hydrolyseopløsning opvarmes i et vandbad centrifugeres, supernatanten udtages, og polypeptidet opnås efter frysetørring.

Denne metode gør brug af de egenskaber, som guanidintiocyanat kan ødelægge cellestrukturen og denaturere proteinet. Det kan ikke kun ekstrahere nukleotider og peptider successivt, men har også fordelene ved enkel metode og høj effektivitet. Samtidig undgår det også problemet med reaktion mellem biokemiske reagenser ved tilsætning af biokemiske reagenser til ekstraktion.